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在免疫印跡實(shí)驗(yàn)中遇到的質(zhì)控問(wèn)題之一最常見(jiàn)的就是高背景。當(dāng)一個(gè)高的背景發(fā)生時(shí)，很難從不相關(guān)的數(shù)據(jù)中區(qū)分出相關(guān)的數(shù)據(jù)。一個(gè)常見(jiàn)的高背景可以由于很多原因?qū)е峦瑫r(shí)需要一些工作來(lái)解決--因?yàn)椴唤鉀Q這些問(wèn)題，這個(gè)印跡無(wú)法讀取.保證緩沖液沒(méi)有被污染一個(gè)被污染的緩沖液在免疫印跡中很容易導(dǎo)致高的背景。大多數(shù)情況下，由...

在生物化學(xué)中，透析是在大分子樣本溶液中通過(guò)選擇性和被動(dòng)擴(kuò)散的原理分離小分子和不想要的化合物的過(guò)程。通常來(lái)說(shuō)，樣品和緩沖液溶液（透析液）放到膜的相反面上。因?yàn)橥肝鐾ㄟ^(guò)擴(kuò)散發(fā)生作用，分子會(huì)自然的從高濃度到低濃度區(qū)域進(jìn)行移動(dòng)直到達(dá)到平衡點(diǎn)。從而協(xié)助樣品和透析液分子的分離。因?yàn)榇蠓肿硬荒芡ㄟ^(guò)膜孔徑，他們會(huì)在...

質(zhì)量差的蛋白轉(zhuǎn)印在免疫印跡的過(guò)程中會(huì)導(dǎo)致要么比較弱的信號(hào)要么沒(méi)有信號(hào).盡管質(zhì)量差的蛋白轉(zhuǎn)印時(shí)有發(fā)生，科學(xué)家們通常不把它作為一個(gè)免疫印跡實(shí)驗(yàn)失敗的原因。因此，當(dāng)需要排除質(zhì)量差的信號(hào)的原因時(shí)轉(zhuǎn)膜的質(zhì)量好壞需要首先被考慮.導(dǎo)致轉(zhuǎn)膜差的原因質(zhì)量差的蛋白轉(zhuǎn)印可能發(fā)生在抗原水平低的情況下。這種情況的發(fā)生通常是因...

當(dāng)?shù)孜锇l(fā)生化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生的能量以光的形式釋放出來(lái)的時(shí)候，我們稱這個(gè)過(guò)程為化學(xué)發(fā)光。魯米諾（luminol）是常用的化學(xué)發(fā)光試劑之一，被過(guò)氧化物氧化后它會(huì)產(chǎn)生一種激發(fā)態(tài)的產(chǎn)物——aminophthalate。這種產(chǎn)物衰變至低能態(tài)的同時(shí)釋放出光子。添加物可以提高魯米諾反應(yīng)的發(fā)光強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間以及靈敏度。...

用層析法，電泳法，免疫化學(xué)的方法對(duì)蛋白樣本進(jìn)行分離或分析前通常需要先進(jìn)行蛋白定量。用比色法進(jìn)行蛋白定量分析的試劑通常分為兩類：一類是間接檢測(cè)法，即檢測(cè)與蛋白螯合后被還原銅離子；另一類是直接檢測(cè)法，即使用與蛋白結(jié)合的染料，檢測(cè)樣品中顏色的變化。所有的檢測(cè)方法都要適用于應(yīng)用的適用性。每種檢測(cè)方法都有它的...

蛋白樣品制備中，在細(xì)胞破碎之后，既可以利用特定蛋白質(zhì)的特性來(lái)分離某一類蛋白質(zhì)，比如親和純化，比如前面介紹的磷酸化蛋白富集，或者膜蛋白富集；另外一個(gè)考慮方向是去除雜質(zhì)----去掉樣品中某些非目標(biāo)高豐度蛋白或者雜質(zhì)的干擾，同樣可以達(dá)到簡(jiǎn)化樣本的目的。當(dāng)然要小心“倒洗腳水的時(shí)候別把嬰兒也倒掉了”，一定要選...